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教您怎么识别高质量的血清
点击次数:261 发布时间:2019-07-23
 

现在市场上的胎牛血清种类繁多,特别是第一次刚接触细胞培养的人很难分辨血清质量的好坏,下面上海沪鼎生物科技有限公司来告诉你血清的制作步骤和辨别方法。

    制作动物血清步骤:
    1.采血:达到放血完全,应选择前腔动脉或静脉放血,注意放血部位的消毒和器具的消毒。

    2.析出血清:采用静置自然析出方法,将析出的血清收集到经消毒的生理盐水瓶内,一般装到生理盐水瓶容量的三分之二,为了更完全的分离血清,过夜后还会有血清析出,继续收集。
 
    3.杀灭病毒的处理:将收集好的血清,瓶口向上放入水浴锅56℃水浴2小时,病毒经高温后失活,而在该温度时,抗体效价不下降。

    4.杀灭细菌,每毫升加2000单位的链霉素和2000单位的青霉素,充分摇均,封口即可使用。
 
    5.存放,不立即使用时,应冷冻保存。

    辨别方法:
    一、外观
    拿到血清,第一接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要。

    1.颜色
    根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。

    2.沉淀
    很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。

    3.澄清度
    进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。

    二、血源
    市场上的血清血源主要分为中国、北美、南美和澳洲。
    1.国产血清质量差,这是公认的,主要原因并不是生产厂家的责任,而是天然环境差和抗生素的大量使用。国内环境污染严重,同时饲养过程中抗生素极其滥用,有毒有害物质会大量残留在血清中,最终不利于细胞的生长。

    2.南美血清,来源很多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等,这些血清由于采血的不可控性,质量参差不齐,当然,相对于国内血清来说好的多。另外,国内销售的南美血清大多颜色鲜红,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,这可能和各国的采血、生产工艺有关。

    3.北美血清,主要来自美国和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。这类血清,等级越高的颜色越淡,表现为淡黄中带一点微红,SH30070和SH30396对比就很明显,特级胎牛血清基本就能进行干细胞培养。北美血清还有一个显著特点就是每瓶血清都能溯源,这对一些大型的疫苗厂、药厂尤为重要。

    4.澳洲血清,来源主要是新西兰和澳大利亚,这是在北美血清禁运之后进入中国市场的,一般不具有溯源功能,由于生产、运输等原因,价格相对来说比较贵。拿Gibco的10099和16000相比较,后者质量等级更高,颜色更淡,性价比更高。

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